高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

　　高效液相色譜柱故障排除

　　1、柱壓過高

　　可能是微粒堵塞，柱床膨脹不可逆吸附，細菌生長等造成的。也有可能是系統(tǒng)反壓問題，例如阻尼器堵塞，進樣器堵塞，管路或連接口堵塞．在線過濾器不干凈，壓力傳感器不準確等。

　　2、重復性差、不出峰、回收率低可能是色譜柱被污染，流動相pH值或者組成不合適造成固定相損失，樣品溶劑不同或樣品本身不穩(wěn)定，固定相極性過強或者流動相極性過弱．或者發(fā)生非特異性吸附。也可能梯度實驗時平衡時間不足，溫度波動，流動相組成改變，樣品溶劑不同，樣品穩(wěn)定性不好，方法的開發(fā)不好，緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。

　　3、柱效低

　　可能是色譜柱被污染、過濾片部分堵塞、色譜柱內的死體積造成，例如流動相pH值或者組成不合適造成固定相損失。流動相急劇變化造成固定相物理損壞，機械振動造成固定相產(chǎn)生裂縫，柱床收縮或干枯。也有可能是儀器連接的問題，認真檢查進樣器、檢測器、管路、保護柱和在線過濾器等是否連接好，也可能是色譜柱沒有平衡好，進樣量過大等問題。