高效液相色譜早期使用隔膜和停流進樣器，裝在色譜柱入口處，現在大都使用六通進樣閥或自動進樣器。進樣裝置要求：密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進樣，進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。
　　1、隔膜進樣。
　　用微量注射器將樣品注入專門設計的與色譜柱相連的進樣頭內，可把樣品直接送到柱頭填充床的中心，死體積幾乎等于零，可以獲得的柱效，且價格便宜，操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上)；此外隔膜容易吸附樣品產生記憶效應，使進樣重復性只能達到1～2%；加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到，常規分析使用受到限制。
　　2、停流進樣。
　　可避免在高壓下進樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動時往往會出現“鬼峰”，另一缺點是保留時間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。
　　3、閥進樣。
　　一般HPLC分析常用六通進樣閥，其關鍵部件由圓形密封墊子(轉子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在，柱效率低于隔膜進樣(約下降5～10%左右)，但耐高壓(35～40MPA)，進樣量準確，重復性好(0、5%)，操作方便。
　　4、自動進樣。
　　用于大量樣品的常規分析。

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