分光光度計計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

　　分光光度計的光譜分布范圍：

　　包括波長范圍為400~760nm的可見光區和波長范圍為200～400nm的紫外光區.不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源.

　　鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的400～760nm波長的光譜,光通過三棱鏡折射后,可得到由紅,橙,黃,綠,藍,靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源.

　　氫燈（或氘燈）的發射光譜:氫燈能發出185～400nm波長的光譜,可作為紫外光光度計的光源.

　　物質的吸收光譜

　　（1）如果在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液,此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗線,即光源發射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜.不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質.物質的吸收光譜

　　（2）當光線通過某種物質的溶液時,透過的光的強度減弱.因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被組成此溶液的物質所吸收,只有一部分光可透過溶液.入射光=反射光分散光吸收光透過光如果我們用蒸餾水（或組成此溶液的溶劑）作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失,則:入射光=吸收光十透過光。

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