①觀察前的準備

a.顯微鏡從鏡箱內拿出時,要用右手緊握鏡臂,左手托住鏡座,平穩地將顯微鏡放置在桌上,離邊緣約5cm,不要將直筒顯微鏡傾斜。

b.調節照明。顯微鏡不能采用直射陽光,可利用燈光或自然光通過反光鏡來調節照明。調節照明的步驟:首先,使用低倍物鏡,旋轉粗調節器,使物鏡和鏡臺間的距離約為3mm。然后,旋轉聚光鏡螺旋,使聚光鏡與鏡臺的上表面相距約1mm。最后,調節反光鏡,使視野的光照效果最佳(光線較強時,用平面反光鏡)。效果不好時,可通過開閉聚光鏡上的孔徑光闌進一步調節。對于自帶光源的顯微鏡,可通過調節電阻旋鈕來調節光照強弱。

c.光軸中心調節。使用帶視場光闌的顯微鏡時,先將光闌縮小,用低倍物鏡觀察,在視場內可見到視場光闌多邊形的物像,如此像不在視場中央,可利用聚光鏡外側的兩個調節螺桿將其調到中央,然后緩慢地將視場光闌打開,直至視場光闌的多邊形物像完全與視場邊緣內接。

②低倍鏡和高倍鏡的使用

a.下降鏡臺(或升高鏡筒),將標本片放置在載物臺上,用標本夾夾住,并使被觀察的標本處在物鏡正下方。

b.轉動粗調節器,升高鏡臺(或下降鏡筒),使低倍物鏡的前端接近載片,用左眼在目鏡上觀察,并轉動粗調節器,使鏡臺下降(或鏡筒上升),至物像出現,然后轉動細調節器,使物像清晰。用標本移動器移動標本片,找到合適的物像,并將其移至視野中央進行觀察。

c.轉動物鏡轉換器把高倍鏡置于鏡筒下方。顯微鏡在設計制造時,都是共焦點的,即低倍鏡對焦后,轉換高倍鏡時一般都能對準焦點,能看到物像,只需轉動細調節器便可使物像清晰。找到需觀察的部位,并移至視野中央進行觀察。

③油鏡的使用

a.滴加鏡油。轉動粗調節器,使鏡臺下降(或使鏡筒上升),在染色標本處滴加1~2滴液體石蠟或香柏油。

b.轉換油鏡。轉動物鏡轉換器,把油鏡置于鏡筒下方。

c.調焦。轉動粗調節器,使鏡臺上升(或鏡筒下降),讓鏡頭的前端浸入鏡油中。操作時要從側面仔細觀察,只能讓鏡頭浸入鏡油中緊貼著標本而避免讓鏡頭撞擊載玻片,導致玻片和鏡頭損壞。然后在目鏡上進行觀察,并緩慢地轉動粗調節器使鏡臺下降(或鏡筒上升)至可看到物像時,再轉動細調節器使物像清晰。

如果在轉動粗調節器使鏡臺下降(或使鏡筒上升)時,油鏡已離開油滴,必須重新進行上述調焦操作。不得邊用左眼在目鏡上觀察,邊轉動粗調節器使鏡臺上升(或鏡筒下降)并使鏡頭前端浸入油滴中,這樣易使鏡頭撞擊載玻片,損壞標本和鏡頭。

d.調節孔徑光闌和視場光闌。把孔徑光闌開到最大,使之與油鏡的數值孔徑相匹配。通過調節視場光闌或照明度控制鈕,選擇合適的照明。

e.顯微鏡使用后的處置。轉動粗調節器,使鏡臺下降(或使鏡筒上升),取出標本玻片,然后先用擦鏡紙擦去油鏡上的香柏油,再用擦鏡紙沾少量二甲苯(不能用酒精)擦去沾在油鏡上的鏡油,最后用擦鏡紙擦凈二甲苯及鏡油。用液體石蠟作鏡油時,只用擦鏡紙即可擦凈,不必用(或僅用極少量)二甲苯。把鏡頭轉成“八”字形,套上鏡罩后放入顯微鏡箱中。